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吴茱萸碱通过 Wnt/β-Catenin 通路对人骨肉瘤细胞的抑制作用

 

Authors Yang S, Chen J, Tan T, Wang N, Huang Y, Wang Y, Yuan X, Zhang P, Luo J, Luo X

Received 11 November 2019

Accepted for publication 25 March 2020

Published 28 April 2020 Volume 2020:12 Pages 2875—2888

DOI https://doi.org/10.2147/CMAR.S238093

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Editor who approved publication: Professor Rudolph Navari

背景:骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤,其预后不佳和治疗方法的局限性决定了开发骨肉瘤治疗新药物迫在眉睫。
目的:本研究旨在通过体外实验探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人骨肉瘤细胞 143B、MG63 细胞株的抗癌作用,同时探讨其潜在机制。
方法:将人骨肉瘤细胞株 143B、MG63 分别经一定浓度梯度 EVO 作用后通过 MTT 法、结晶紫法、集落形成试验检测其对两种细胞增殖能力的影响。运用划痕试验、Transwell 及基质胶试验检测对其对两种细胞迁移及侵袭能力的影响。通过 Hochest 33258 染色法检测其对两种细胞凋亡的影响。然后通过流式细胞周期、Western blot 蛋白质印迹法检测 143B 的细胞周期变化及相关蛋白表达水平。利用荧光素酶报告基因系统分析 143B 细胞中 Wnt/β-catenin 信号通路的活化情况,再用蛋白质印迹法检测该信号通路中关键因子 β-catenin 及下游靶蛋白的表达情况。
结果:MTT 法、结晶紫法、集落形成实验结果表明 EVO 对细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性。细胞迁移和侵袭试验结果也表明其具有相关抑制作用。Hoechst 33258 染色法显示 EVO 诱导细胞凋亡呈剂量依赖性。流式细胞周期结果则表明经 EVO 处理的 143B 细胞被阻滞在 G2/M 期。此外,经 EVO 处理组的荧光素酶活性较未处理组明显下降,相应通路蛋白的表达水平也证明了 EVO 在骨肉瘤细胞中通过抑制 Wnt/β-catenin 信号通路发挥抗癌作用。
结论:EVO 可抑制人骨肉瘤细胞 143B 及 MG63 的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,并在一定时间内呈药物浓度依赖性,该作用可能与其阻断 Wnt/β-catenin 信号通路有关,提示 EVO 可能成为治疗骨肉瘤的新方法。
关键词:吴茱萸碱;骨肉瘤;抑癌作用;Wnt/β-catenin 通路




Figure 6 An illustration of how EVO exerts anticancer activity in...