目的：研究 Sortilin 和基质囊泡在 Nε-羧甲基赖氨酸诱导的糖尿病动脉粥样硬化钙化中的作用。
方法：人体水平，通过酶联免疫吸附试验和皮尔逊相关分析，探讨人血清中 Nε-羧甲基赖氨酸与血清基质囊泡中 Sortilin 与 CD9（基质囊泡的标记蛋白）的相关性。动物水平，构建糖尿病 apoE^-/- 小鼠模型，尾静脉注射 Nε-羧甲基赖氨酸和基质囊泡，通过钙化染色、免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法观察主动脉钙化情况及相关蛋白的表达。细胞水平，不同处理下平滑肌细胞释放的基质囊泡水平通过纳米跟踪分析检测。分别用基质囊泡和 Sortilin 抗体处理平滑肌细胞后，使用茜素红染色观察细胞钙化。
结果：对患者的血清学分析表明，血清基质囊泡中 Sortilin 和 CD9 的浓度与血清中 Nε-羧甲基赖氨酸的浓度成正相关。动物实验表明，Nε-羧甲基赖氨酸可以促进糖尿病动脉粥样硬化钙化的发展，并增加 Sortilin 在斑块中的表达。尾静脉注射 Nε-羧甲基赖氨酸诱导的平滑肌细胞衍生的基质囊泡后，糖尿病 apoE^-/- 小鼠的动脉粥样硬化钙化明显加重。细胞实验结果表明，高浓度的 Nε-羧甲基赖氨酸能够显著促进基质囊泡从平滑肌细胞的释放。来自该来源的基质囊泡能够加剧受体细胞钙化，而 GW4869 的处理（一种广泛使用的细胞外囊泡生物发生抑制剂）可显著降低细胞钙化。最后，高浓度 Nε-羧甲基赖氨酸还可以促进 Sortilin 募集至基质囊泡，而 Sortilin 抗体可以明显减弱基质囊泡引起的细胞钙化。
结论：我们证明 Nε-羧甲基赖氨酸不仅影响平滑肌细胞中基质囊泡的释放，而且还影响 Sortilin 向基质囊泡的募集，从而促进糖尿病动脉粥样硬化钙化。这一发现可能为针对性预防糖尿病血管钙化提供新的策略。
关键词：Nε-羧甲基赖氨酸；Sortilin；基质囊泡；斑块钙化；糖尿病