摘要：耐多药大肠杆菌是最致命的病原体之一，会产生危及生命的感染。本研究拟对巴基斯坦临床分离的大肠杆菌的 mcr-1、bla _KPC-2 和 bla _NDM-1 进行分子流行病学检测。
方法：收集 2018 年 6 月至 2019 年 9 月临床标本中大肠杆菌 545 株。采用微量稀释法、双盘增效试验（DDST）和改良霍奇试验（MHT）对所有分离株进行粘菌素耐药、超广谱-β-内酰胺酶（ESBL）和碳青霉烯酶筛查。对 mcr、ESBL 和碳青霉烯酶编码基因进行检测、序列分型、偶联转移、S1-PFGE、质粒复制分型和 DNA 印迹。
结果：4 株（0.73%）耐粘菌素菌株同时携带 mcr-1  和 bla _CTX-M-15 基因，其中 3 株还携带 bla _TEM  基因。139 株分离株中检出 ESBL 基因，占 25.5%，同时分离出 blac _TXM-15（74.82%）、bla _TEM（34.53%）、bla _SHV（28.06%）和 bla _OXA-1（28.78%）。在 129 个碳青霉烯酶菌株中，bla _NDM-1 基因占 35.83%，bla _KPC-2 基因占 26.67%，bla _OXA-48 基因占 8.3%，bla _VIM-1 基因占 25%，bla _IMP-1 基因占 20.83%。序列分型结果显示，mcr-1  所携带菌株为 ST405、ST117 和 ST156。在 ST131 和 ST1196 上 bla _KPC-2 和 bla _NDM-1 的阳性率分别为 50% 和 48.83%。本研究还鉴定出 ST7584 和 ST8671 两种罕见型菌株。mcr-1  基因定位于 Incl2（60 kb）质粒上。bla _KPC-2 位于（140 kb） IncH12、（100 kb）IncN、（90 kb）Incl1 上，bla _NDM-1 位于（70 kb）IncFIIK、（140 kb）IncH12、（100 kb）IncN、（60 kb）IncA/C 和（45 kb）IncFII质粒上，并成功反式结合。在质粒类型中，Incl1 携带 bla _KPC-2， IncH12 携带 bla _KPC-2 和 bla _NDM-1，而 IncFIIK 携带 bla _NDM-1 在巴基斯坦首次被检测到。
结论：在不同克隆类型和质粒类型中发现的 mcr-1、bla _KPC-2 和 bla _NDM-1 基因表明在临床菌株中存在大量抗性基因的选择。
关键字： 粘菌素耐药； 超广谱-β-内酰胺酶； 碳青霉烯酶； mcr1 ；bla _KPC-2； bla _NDM-1；质粒；大肠杆菌