目的：循环肿瘤细胞（Circulating tumor cell，CTC）检测对肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）的早期诊断、预后评估、指导个性化治疗具有重要指导作用，以上功能的实现均依赖于高效灵敏的 HCC CTC 捕获分离技术。目前基于上皮细胞粘附分子（Epithelial cell adhesion molecule，EpCAM）的检测系统存在 EpCAM 在 HCC 中低表达、不能实现捕获 CTC 实时观察的问题，使得该系统不适用于 HCC CTC 检测。本研究旨在开发一种能高效捕获 HCC CTC 的检测方法。
方法：本研究制备了一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3（Glypican-3，GPC3）靶向荧光免疫磁性纳米载体（C6/MMSN-GPC3），用于 HCC CTC 高效捕获与实时观察。选择在 HCC CTC 中特异表达、稳定性好的高表达受体 GPC3 作为靶点捕获 HCC CTC，以超顺磁性 Fe₃O₄ 纳米粒为核心，表面进行二氧化硅材料修饰，其丰富的官能团利于 GPC3 抗体连接，独特的介孔结构能够装载荧光素香豆素 6（Coumarin 6，C6），更方便利用荧光实时观察捕获到的 CTC。
结果：在模拟临床样本检测中，C6/MMSN-GPC3 与基于 EpCAM 商业化磁珠（MACS^® Beads）捕获性能比较，对肝癌 CTC 显示出更高的捕获效率；在临床样本检测中，C6/MMSN-GPC3 能捕获到更多 CTC，捕获效率较 MACS^® Beads 提高了 83.3%-350%。其中，在一例I期 HCC 患者和一例术后患者的外周血中检测到 CTC，显示出一定的早期诊断与预后评估的潜能。C6/MMSN-GPC3 能成功在临床样本中高效捕获与实时观察到 CTC，在健康人的外周血中没有检测到 CTC，具有良好的临床应用转化前景。
结论：本研究构建了一种基于 GPC3 靶向荧光免疫磁性纳米载体实现了肝癌患者血液中 CTC 的特异性分离和实时观察。
关键词：免疫磁荧光系统，循环肿瘤细胞，肝细胞癌，磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3（glypican-3，GPC3），早期诊断