目的：利福平（RIF）耐药是耐多药结核病（MDR-TB）的替代标志，由编码 RNA 聚合酶的 rpoB 基因突变介导。我们旨在研究结核分枝杆菌（Mtb）临床分离株的整个 rpoB 基因突变模式的普遍性及其与 RIF 耐药水平的关系。
方法：广州市胸科医院收集了 465 例临床分离菌株，通过比例法和 Bactec MGIT 960 系统对 175 株确认为 Mtb 的临床株进行了药敏检测，使用 GeneXpert MTB/RIF 和 Sanger 测序确定遗传特征，并使用阿尔玛蓝试验测定 RIF 的最小抑菌浓度（MIC）。
结果：我们发现了 50/175 株（85.71%）RIF 耐药菌株（MIC：4 至 > 64 µg/mL），其中 57 株为 MDR Mtb，81 株为前广泛耐药（pre-XDR）。遗传分析发现 146/150（97.33%）株耐药菌株的 rpoB 的 RIF 耐药决定区（RRDR，密码子 426-452）中有 17 种突变，主要位于：L430（P）、D435（V、E、G、N）、H445（N、D、Y、R、L）、S450（L、F）和 L452（P）。D435V 12/146（8.2%）、H445N 16/146（10.9%）和 S450L 70/146（47.94%）是最常见的突变。RRDR 中很少发现 Q432K、M434V 和 N437D 突变。在三株 RIF^R 菌株的 RRDR 中首次检测到（1284-1289 CCAGCT）、（1295-1303 AATTCATGG）和（1300-1302 TTC）的缺失和插入。我们在 RRDR 外检测到 47 种突变和插入/缺失。在 RRDR 之外仅检测到 4 株 RIF^R 菌株的新突变/缺失和插入，分别为（K274Q+C897del+I491M）、（A286V+L494P）、（G1687del+P454L）和（TT1835-6 ins+I491L）。与表型特征相比，GeneXpert MTB/RIF 和测序分析的诊断敏感性分别为 95.33%（143/150）和 100%（150/150）。
结论：研究结果强调了 RRDR 突变的关键作用以及非 RRDR 突变在 RIF^R 临床分离株的快速分子诊断中的贡献。这些结果能支持疾病的早期发现，并有利于在高 TB 负担环境中推荐适当的抗 TB 治疗方案。
Keywords: rifampicin-resistance, Mycobacterium tuberculosis, rpoB, GeneXpert MTB/RIF, resistance-determining region