解微微^1#，高佳明^2#，梁英然^1#，黄晨星³，张博洋¹，陈晓楠¹，姚茜¹，南国¹，吴红华¹，王跃飞¹，吴林⁴，王泰一^5,6*，朱彦^1*

1.天津中医药大学组分中药国家重点实验室，天津 301617

2.中国中医科学院西苑医院基础医学研究所，北京市中药药理重点实验室，北京 100091

3.山东中医药大学针灸推拿学院（针灸研究所），山东 济南 250355

4.北京大学第一医院心内科，北京100034

5.山东中医药大学，山东省中医基础理论创新应用研究重点实验室，山东 济南 250355

6.山东中医药大学针灸推拿学院（针灸研究所），山东 济南 250355

^#共同第一作者

*通讯作者

朱彦，天津中医药大学组分中药国家重点实验室，天津301617。电子邮箱：yanzhu.harvard@icloud.com；

王泰一，山东中医药大学中医基础理论创新与应用研究山东省重点实验室，山东济南 250355。电子邮箱：wangtaiyi@sdutcm.edu.cn 。

摘要

目的：心脏主要的电压门控型钠离子通道 Na_V1.5（I_Na）对心脏动作电位的起始及传导至关重要。复方中药稳心颗粒（WXKL）已被证实具有抑制心律失常和心力衰竭的作用，然而其活性成分尚不明确。本研究旨在筛选和鉴定稳心颗粒中 I_Na 的活性抑制剂，并探究其在电生理传导中的作用方式。

方法：首先构建稳心颗粒水提物化学组分库，利用全自动膜片钳系统在稳定表达 Na_V1.5 基因 SCN5A 的细胞系中进行I_Na抑制活性的高通量筛选。采用高效液相色谱-电喷雾-离子阱-飞行时间质谱（HPLC- ESI-IT-TOF-MS）和气相色谱-质谱（GC-MS）分析具有 I_Na 抑制活性的候选组分，以鉴定其中的成分单体。通过对鉴定出的 Na_V1.5 阻断分子的单细胞膜片钳电生理记录、分子对接和分子动力学模拟方法，评估其对 SCN5A 的抑制率和作用机制，在人诱导多能干细胞（hiPSC）来源的心肌细胞中进行功能验证。

结果：对稳心颗粒化学组分库的初步筛选，鉴定出 5 个能够显著抑制 Na_V1.5 通道的组分，其中一个富含多饱和脂肪酸。分子结构表征显示，该活性亚组分中存在月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸。电生理特性分析表明，月桂酸（LA）是抑制 I_Na最有效的单体，其半数抑制浓度（IC₅₀）为 27.40 ± 12.78 μM。月桂酸使 I_Na的稳态失活向更负的电位偏移，同时降低hiPSC 衍生心肌细胞的细胞外场电位幅度。我们首次证明，天然中链饱和脂肪酸月桂酸是一种潜在的新型 I_Na 阻断剂。分子对接和分子动力学模拟表明，月桂酸以显著的结合亲和力与 Na_V1.5 蛋白结合，与功能关键残基形成相互作用，从而阻断 Na⁺ 的内流。分子机制上，月桂酸作用于 Na_V1.5 的快速失活，改变了 hiPSC 衍生心肌细胞的电生理传导，从而发挥稳心颗粒的抗心律失常作用。

结论：月桂酸是钠通道 Na_V1.5 的强效阻断剂，通过抑制 I_Na 减轻心律失常。

关键词：月桂酸；稳心颗粒；心律失常；Na_V1.5 钠通道；膜片钳记录；高通量电生理学