杨震^1，2 考星宇^1，2 张琳³ 黄娜^1，2 陈景利² 何明丰²

1.广州中医药大学第八临床医学院，中国广东省佛山市

2.佛山市中医院，中国广东省佛山市

3.南方医科大学中西医结合医院心血管科，中国广东省广州市

摘要

背景：大柴胡汤（DCHD）是治疗脓毒症诱导的急性肺损伤（SALI）的常用中药复方。泛凋亡是一种新型的程序性细胞死亡类型。然而，DCHD通过抗泛凋亡对抗SALI的机制尚不清楚。

方法：首先，我们利用相关数据库和已发表的文献确定了DCHD、SALI和泛凋亡之间的交叉靶点。然后，进行蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络、分子对接和功能富集分析。在体内实验，采用盲肠结扎穿刺构建脓毒症小鼠模型，采用苏木精和伊红（H&E）染色、实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和ELISA等方法评价DCHD对SALI的治疗效果。最后，在体外实验，我们采用qRT-PCR、免疫荧光染色和免疫印迹法验证DCHD含药血清（DCHD-DS）对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞的影响。

结果：通过将DCHD、SALI和泛凋亡靶点取交集，确定了82个交集靶点。富集分析表明，DCHD通过抗泛凋亡对抗SALI主要通过调节肿瘤坏死因子（TNF），AGE-RAGE，磷酸肌醇3激酶（PI3K）-AKT和toll样受体信号通路通过靶向Casp3、TP53、Bcl2、TLR4、STAT3、STAT1、RELA、NF-κB1、MCL1、JUN、IL-1β、HSP90AA1、Casp9、Casp8和Bcl2l1。分子对接分析显示，DCHD的关键成分对核心靶点具有较高的结合亲和力。在体内实验，DCHD改善肺组织病理损伤，降低炎症因子表达，减轻肺组织氧化应激损伤。在体外实验，DCHD-DS可减轻细胞形态的改变、促炎因子的释放和p65细胞核的聚集。此外，我们还证实了DCHD-DS通过下调PI3K/AKT/NF-κB信号通路来抑制泛凋亡。

结论：DCHD通过控制PI3K/AKT/NF-κB通路抑制细胞泛凋亡，从而改善SALI。本研究为研究DCHD的作用机制及其在SALI治疗中的临床应用提供了坚实的基础。

关键词：大柴胡汤、脓毒症诱导的急性肺损伤、泛凋亡、网络药理学、生物信息学