摘要

背景：骨质疏松是一种以骨密度降低为特征的重大公共卫生问题。在各种治疗策略中，凋亡细胞外囊泡（ApoEVs）已成为组织再生领域极具潜力的治疗手段。特别是T细胞来源的ApoEVs在促进骨再生方面展现出巨大潜力。然而，ApoEVs能否通过膜表面分子发挥酶活性促进骨量恢复，目前尚不清楚。因此，本研究拟探讨T细胞来源的ApoEVs能否促进骨质疏松小鼠骨量恢复，并揭示其潜在机制。

方法：通过梯度离心法分离ApoEVs，并通过质谱鉴定其蛋白质组学特征。通过Western blot和免疫胶体金染色明确ApoEVs上CD39和CD73的富集情况。通过检测腺苷三磷酸（ATP）和腺苷的水平，评估CD39和CD73在水解ATP为腺苷过程中发挥的作用。使用CD39和CD73的抑制剂以及A2B腺苷受体（A2BR）拮抗剂探索ApoEVs促进骨再生的分子机制。

结果：ApoEVs治疗显著缓解了卵巢切除小鼠（OVX）的骨量流失，并促进了骨髓间充质干细胞（BMMSCs）的成骨分化潜能。本研究发现OVX小鼠骨髓中细胞外ATP水平升高，而CD39和CD73（ATP转化为腺苷的关键酶）水平降低。此外发现ApoEVs膜上富含CD39和CD73，其能够分别在体外和体内水解细胞外ATP为腺苷。进一步，ApoEVs产生的腺苷通过A2BR和下游蛋白激酶A（PKA）信号通路抑制炎症反应并促进成骨。

结论：T细胞来源的ApoEVs通过表面富集的CD39和CD73，将细胞外ATP水解为腺苷，进一步通过A2BR和PKA信号通路促进骨再生。本研究揭示了T细胞来源的ApoEVs在治疗骨质疏松中的重要作用，为开发基于ApoEVs的组织再生治疗策略提供了新思路。

关键词：T细胞凋亡；凋亡细胞外囊泡；CD39；CD73；腺苷；骨再生