研究目的

敛疮止血液（LianChuang ZhiXue Liquid, LCZXL）是中医经典方剂之一，其灌肠液直接作用于肠道，对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）患者有较好临床疗效。然而，LCZXL灌肠作用于UC的具体分子机制尚未明确，本文将从Jagged-1/Notch1信号通路和巨噬细胞极化的角度探讨LCZXL灌肠对UC的潜在作用机制。

研究方法

成功建立UC 小鼠模型，实验分两部分进行：实验 I：对照组、模型组、美沙拉秦组、低剂量 LCZXL 组（LCZXL-L）、高剂量 LCZXL 组（LCZXL-H）；分别于第 1、3、5、7、9、11 和 13 天记录体重和疾病活动指数（Disease Activity Index，DAI）评分。第 14 天处死小鼠，测量其结肠长度并统计结肠黏膜损伤指数（colon length was measured and the damage index，CMDI）、闭锁小带蛋白1 (Zonula occludens-1，Zo-1)和HE染色，观察结肠损伤情况。ELISA检测血清细胞因子的含量。通过 IF 双染色、PCR、WB 和流式细胞术观察 M1 和 M2 巨噬细胞标记物以及定量分析 Jagged-1/Notch1 信号通路相关蛋白含量。实验II：对照组、模型、重组小鼠 Jagged-1 蛋白/Fc（Jagged-1/Fc）、LCZXL、Jagged-1/Fc+LCZXL。通过 WB 和流式细胞术观察 M1 和 M2 巨噬细胞标记物及分析 Jagged-1 蛋白。

研究结果

结果表明，LCZXL 灌肠能降低DAI 和 CMDI 评分，减轻 UC 小鼠的结肠损伤。DSS诱导的UC模型CD86、iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著上调，Arg1、CD206、IL-4和IL-10水平下调，激活Jagged-1、Notch1和Notch2分子水平。LCZXL灌肠能够有效抑制UC模型中CD86、TNF-α、IL-1β和IL-6水平，并提高了CD206、Arg1、IL-4和IL-10的分子表达。而Notch信号通路激活剂Jagged-1/Fc加剧了M1巨噬细胞的极化和UC小鼠结肠损伤，LCZXL灌肠治疗可逆转这种情况，阻止Jagged-1/Notch1信号通路的激活从而修复结肠黏膜的损伤。

结论

我们的研究发现，LCZXL灌肠保护肠道黏膜的作用机制可能是通过调节Jagged-1/Notch1信号通路，抑制M1、促进M2巨噬细胞极化来实现的。