摘要

目的：为了解决雷公藤红素（Ce）在乳腺癌中的疗效和毒性问题，我们首次开发了一种具肿瘤靶向能力的无载体纳米体系。该体系利用甲氨蝶呤（MTX）内源性叶酸基团实现主动肿瘤靶向，并产生协同抗肿瘤作用。

方法：采用溶剂沉淀法制备了雷公藤红素-甲氨蝶呤无载体纳米粒(Ce-MTX NPs)，并优化了其制备工艺，通过粒径、多分散指数(PDI)、包封率(EE)、载药率(LE)及透射电镜(TEM)观察等手段对纳米粒进行体外表征，并应用透析法研究了其在生理条件和肿瘤模拟环境下的药物体外释放行为。在A549和4T1细胞系中评估了纳米粒的细胞摄取率和体外抗肿瘤效果，并通过4T1荷瘤小鼠模型分析了药物的体内靶向分布情况，同时通过肿瘤生长曲线、抑瘤率、体重变化、脏器指数、组织病理学分析和血清生化等指标对纳米粒的抗肿瘤疗效及生物安全性进行了综合评价。

结果：优化后的Ce-MTX NPs粒径为90.20 nm，PDI值为0.062，呈近球形形态。Ce在纳米粒中的包封率和载药率分别为95.15%和66.53%，MTX分别为95.74%和33.6%。该纳米粒在7天内表现出良好的稳定性。此外，Ce-MTX NPs具有pH依赖性药物释放特性，在pH 5.5条件下药物释放速度显著加快。细胞摄取实验显示，4T1细胞对Ce-MTX NPs的摄取率显著高于游离药物，且表现出良好的叶酸受体靶向性。细胞毒性实验表明，Ce-MTX NPs在4T1细胞中比游离药物混合物具有更强的抗肿瘤活性，证实了其具有优异的协同抗肿瘤效果。体内实验结果表明，该纳米粒能显著抑制肿瘤生长，并具有良好的生物安全性。

结论：无载体Ce-MTX NPs展现出良好的稳定性、肿瘤靶向性及在肿瘤细胞内快速释放药物的特性，显著提升了乳腺肿瘤治疗的疗效与生物安全性。这种纳米粒为联合癌症治疗提供了一种有前景的策略，在纳米医学领域具有巨大的发展潜力。

关键词：雷公藤红素、甲氨蝶呤、无载体纳米颗粒、肿瘤靶向、乳腺癌、协同抗肿瘤