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Authors Yu Y, Su G, Zhu H, Zhu Q, Chen Y, Xu B, Li Y, Zhang W
Received 17 May 2017
Accepted for publication 13 July 2017
Published 17 August 2017 Volume 2017:12 Pages 5903—5914
DOI https://doi.org/10.2147/IJN.S142015
Checked for plagiarism Yes
Review by Single-blind
Peer reviewers approved by Dr Alexander Kharlamov
Peer reviewer comments 3
Editor who approved publication: Dr Linlin Sun
摘要:以邻位杂交介导的等温指数扩增反应为基础,我们构建了一个新型的电化学传感平台用于蛋白质的超灵敏检测。通过合理的设计,我们将靶蛋白识别适配体(Aptamer)成功嵌入两个 DNA 探针内部。利用邻位杂交原理,蛋白质的识别过程可成功转化为 DNA 的组装事件。适配体对蛋白质的识别会提高相应探针的局部浓度,进而触发后续的链替换过程。此时,Output 序列会被释放,从而可以与固定在金电极表面的双螺旋探针作用使其解链。等温指数扩增过程随着双螺旋的解链而触发,通过链的延长与酶切,生成了大量的 Output 序列,进而重复上一个循环过程。电极表面的双螺旋探针裂解后,金纳米粒子的杂交序列变为游离状态,从而可以与 G-四链体修饰的金纳米粒子杂交。G-四链体-血红素复合物具有拟过氧化物酶活性,在过氧化氢存在下可对 3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)进行催化氧化,进而产生电化学信号的改变。我们所提出的检测方案对表皮血小板生长因子(PDGF-BB)具有较高的灵敏度,检测限可达到 52 fM。同时,此方法对其他 PDGF 的亚型具有良好的选择性,并且可用于稀释的血清样品检测。
关键词:电化学生物传感器,邻位杂交,PDGF-BB,等温指数扩增,G-四链体
