目的：从天然产物中开发高效、低毒的新型抗心肌缺血药物是目前心血管新药开发的热门趋势。在初步筛选试验中，发现蒲葵叶乙醇提取物具有良好的抗氧化活性。本研究旨在进一步筛选蒲葵叶片中的抗氧化成分，并评价其在细胞水平上对急性心肌缺血的治疗效果。
材料与方法：基于在线 1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）-高效液相色谱（HPLC）联用筛选结果，指导制备型高效液相色谱（prep-HPLC）从蒲葵叶乙醇提取物中分离纯化出抗氧化成分。再用离线 DPPH 法对各组分的自由基清除能力进行了验证。通过分别建立缺氧/复氧（H/R），H₂O₂ 和阿霉素（ADM）分别诱导的三种 H9c2 细胞损伤模型，评价并验证这些抗氧化成分在体外的心肌细胞保护作用。
结果：从蒲葵叶片中快速分离和鉴别 5 种抗氧化成分，即荭草素、异荭草素、牡荆素、异牡荆素和苜蓿素。通过离线 DPPH 测定进一步检测这些成分的 IC₅₀ 值，分别为 15.51±0. 22、6.94±0.38、11.86±0.24、8.89±0.66 和 31.86±0.24 μg / mL。在这些成分中，异荭草素显示出最强的抗氧化作用，与阳性对照药物（维生素 C，IC₅₀：6.99±0.62 μg/mL）相当。在三种 H9c2 细胞损伤模型中，这五种成分分别表现出不同程度的心脏保护作用。其中异荭草素具最强的保护作用。五种成分对正常 H9c2 细胞均无细胞毒性作用。
结论：蒲葵叶乙醇提取物含有 5 种低毒的，具心肌细胞保护作用的抗氧化成分。异荭草素具最强的抗氧化作用，也是该提取物发挥心肌保护作用最主要的药效物质成分。
关键词：活性导向分析；抗氧化成分；保护作用；黄酮；H9c2 细胞