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线粒体 P-糖蛋白赋予卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性

 

Authors Guo W, Dong W, Li M, Shen Y

Received 4 November 2018

Accepted for publication 27 February 2019

Published 17 May 2019 Volume 2019:12 Pages 3881—3891

DOI https://doi.org/10.2147/OTT.S193433

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Editor who approved publication: Dr Federico Perche

研究背景:亚细胞水平 P-糖蛋白(P-gp)的表达在多种肿瘤的多药耐药性(MDR)中发挥重要作用。然而,卵巢癌中线粒体 P-gp 的表达和其功能活性尚不清楚。本研究分离纯化卵巢癌细胞 A2780 及其紫杉醇耐药细胞系 A2780T 的线粒体并探索线粒体 P-gp 的表达和功能。
研究方法:我们采用免疫组化方法研究卵巢癌细胞 P-gp 的表达及亚细胞定位,采用免疫荧光和激光共聚焦显微镜检测卵巢癌组织标本和细胞系中 P-gp 和线粒体的共定位,采用免疫印迹、透射电镜和 JC-1 试剂盒评估提取线粒体的纯度,完整性和活性,采用免疫印迹评估全细胞和线粒体中 P-gp 的表达,流式细胞学分析线粒体 P-gp 的外排功能。
研究结果:P-gp 在 A2780T 细胞的细胞膜,细胞株和细胞核中均有表达,在 A2780 细胞中无表达。在 A2780T 细胞和卵巢癌组织中 P-gp 与线粒体存在共定位现象,A2780 细胞中则未观察到此现象。提取线粒体的完整性、纯度高和活性很高。P-gp 在 A2780T 细胞和线粒体中高表达,在 A2780 中无表达。A2780T 细胞线粒体对 Rho123 的外排率显著高于 A2780 细胞线粒体(43.2% vs 9.6%),这种现象可以部分被 P-gp 的抑制剂环孢素 逆转。
研究结论P-gp 在紫杉醇耐药卵巢癌细胞和卵巢癌组织中高表达并参与药物外排,它可能帮助癌细胞逃离化疗损害。
关键词:卵巢癌,线粒体,P-糖蛋白,多药耐药




Figure 1 Identification the purity, integrity and activity of isolated mitochondria.