研究背景：耐药的发生和白血病干细胞的持续存在是酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗慢粒白血病（CML）过程中所面临的严峻挑战。因此，探索 CML 治疗的新策略仍具有十分重要的意义。研究表明自噬与白血病关系密切，而诱导肿瘤细胞自噬性死亡则可作为白血病治疗的一个新途径。BCR/ABL 融合蛋白是 CML 发生发展的关键驱动者，我们的前期研究结果显示携带自噬基因 Beclin1 的溶瘤病毒感染 CML 细胞后能引起 BCR/ABL 蛋白水平的下调，并通过激活自噬性而显著增加溶瘤病毒对 CML 细胞的杀伤效应。但对 Beclin1 调控 BCR/ABL 及杀伤 CML 细胞的具体分子机制尚不十分清楚。
研究方法：我们利用 GST-pulldown、免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因实验来验证 BCR/ABL 与 Beclin1 间的相互作用；利用 CCK-8 和克隆形成实验评估细胞生长增殖能力；利用 Western blot 技术检测相关蛋白的表达水平；利用透射电子显微镜观察自噬小体；利用携带 Atg7、UVRAG 特异性 shRNA 或 Beclin1 过表达质粒的慢病毒载体去调控上述基因的表达水平；利用免疫荧光实验观察 BCR/ABL 和 p62/SQSTM1 的共定位情况；利用流式分选技术从 CML 患者骨髓标本中获取 CD34^＋CD38^－细胞。
研究结果：在本研究中我们发现 Beclin1 与 BCR/ABL 间存在直接相互作用。Beclin1 能抑制 BCR/ABL 启动子活性而下调蛋白表达，并通过激活自噬信号通路促使下游 p62/SQSTM1 与 BCR/ABL 共定位至自噬溶酶体而发生降解。在 CML 细胞株 K562 或 CD34^＋CD38^－干细胞中过表达 Beclin1 能显著抑制细胞生长增殖并诱导自噬。
研究结论：我们的研究结果提示利用 Beclin1 过表达诱导自噬可能是治疗 TKI 耐药 CML 并清除白血病干细胞的一种新策略，具有重要的临床意义。
关键词：CML；自噬；BCR/ABL；Beclin1；白血病干细胞