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单克隆抗体 AC10364 诱导凋亡并抑制 5-氟尿嘧啶耐药肝细胞癌细胞增殖
Authors Wu J, Qu J, Cao H, Jing C, Wang Z, Xu H, Ma R
Received 23 February 2019
Accepted for publication 16 May 2019
Published 28 June 2019 Volume 2019:12 Pages 5053—5067
DOI https://doi.org/10.2147/OTT.S206517
Checked for plagiarism Yes
Review by Single-blind
Peer reviewers approved by Ms Aruna Narula
Peer reviewer comments 3
Editor who approved publication: Dr Takuya Aoki
背景:本研究旨在研究单克隆抗体(AC10364)的体外抗肿瘤活性,并阐明 AC10364 对 5-氟尿嘧啶耐药肝细胞癌细胞株(bel/fu 细胞)生长抑制的相关机制。
方法:细胞毒性试验检测 AC10364 对 Bel/fu 细胞增殖的抑制作用。AC10364 作用细胞 24 小时后,PI 染色法检测 Bel/fu 细胞的凋亡。AC10364 作用 0、12、24 或 36 小时的 Bel/fu 细胞裂解液通过 Western blot 测定凋亡蛋白或因子的表达情况。AC10364 作用 12、24 或 36 小时的 Bel/fu 细胞通过 RT-PCR 分析与肿瘤发生或生长相关的基因表达情况。
结果:Bel/fu 细胞早期凋亡率随 AC10364 作用浓度的增加而增加。胱天蛋白酶的水平,包括裂解的胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-3 和胱天蛋白酶-9,在 AC10364 作用过的 Bel/fu 细胞中显著升高(P <0.001)。与未处理的细胞相比,AC10364 作用过的 Bel/fu 细胞中结合蛋白基因(G 蛋白亚基 α
15,GNA15)和其他蛋白编码基因表达的显著下调,比如:fms 相关酪氨酸激酶 1(FLT1)、烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)、人轴突生长诱向因子 4(NTN4)、血小板衍生生长因子亚基 A(PDGFA)、S100 钙结合蛋白 A11 (S100A11)、微管蛋白 β3(TUBB3)、醛糖酮还原酶家族 1 成员 C3(AKR1C3)。但是,AXL 受体酪氨酸激酶(AXL)和羧肽酶 A4(CPA4)基因表达水平显著上调(P <0.001)。
结论:AC10364 通过与肿瘤发生或生长相关的多种基因的异常表达抑制细胞生存和增殖,提示这些基因可能是肿瘤治疗的有希望的候选治疗基因。
关键词:单克隆抗体,抑制,凋亡,基因
