研究背景：胰腺癌是消化系统恶性程度极高的肿瘤，且常伴随着早期转移和药物抵抗。原肌球蛋白是肌肉收缩过程中不可或缺的调节蛋白，TPM 基因的表达异常与恶性肿瘤的发生和转移密切相关。
目的：本实验通过利用慢病毒法在人胰腺癌 PANC-1 细胞中敲低 TPM3 的表达建立单克隆稳转细胞株，探究 TPM3 基因的低表达对 PANC-1 细胞的 EMT 相关分子及生物学行为的影响。
方法：我们根据 TPM3 基因序列，设计 RNA 干扰序列，构建、筛选出沉默效果最佳的重组质粒 TPM3-shRNA 片段，进行慢病毒滴度测定及包装；将重组慢病毒干扰载体 LV-TPM3-shRNA 转染至人胰腺癌 PANC-1 细胞，评估转染效率，筛选出 TPM3 基因低表达的 PANC-1 单克隆稳定转染细胞株；通过采用 qRT-PCR、Western Blot 法检测目的细胞株中 EMT 相关转录因子在基因和蛋白水平的表达变化，再分别检测其侵袭和增殖能力的变化。
结果：通过重组慢病毒干扰载体成功建立了 TPM3 基因低表达的人胰腺癌 PANC-1 单克隆稳转细胞株。敲低人胰腺癌 PANC-1 细胞 TPM3 基因表达后细胞发生 EMT 转变，诱导细胞表型发生恶性转化，同时细胞的体外增殖、侵袭等生物学行为都获得不同程度增强。
结论：这些结果表明 TPM3 基因可作为胰腺癌治疗的一个潜在靶点。
Keywords: pancreatic cancer, TPM3, lentivirus, EMT, proliferation, invasion