目的：由广泛使用抗真菌剂及生物膜形成而导致的抗真菌剂耐药是目前严重的临床挑战。积极研发新型抗真菌感染治疗策略迫在眉睫。本项研究旨在评估天然生物活性碱小檗碱对浮游态及生物膜态念珠菌的体外抗真菌作用。
方法：本研究参照 CLSI M27-A3 标准方法进行小檗碱对浮游态念珠菌的梯度稀释药敏实验，共检测了 5 种标准念珠菌菌株，包括白念珠菌（ATCC 90028，ATCC 10231），克柔念珠菌（ATCC 6258），光滑念珠菌（ATCC 90030），都柏林念珠菌（MYA 646），和 6 个临床分离念珠菌株（CLC1 – CLC6）。运用 XTT 还原法评估小檗碱对念珠菌生物膜的抑制作用，测定吸光度值，并使用浓度-吸光度曲线说明其变化趋势。通过共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）量化实验结果，并进行三维立体生物膜重建。本研究用独立样本t检验分析念珠菌生物膜的活性抑制率、生物膜生成和厚度减少率，单因素方差分析检测五种念珠菌菌株之间的差异。
结果：上述五种念珠菌标准株的最小抑菌浓度（MIC）分别为 80 μg/ mL，160 μg/ mL，10 μg/ mL，20 μg/ mL 和 40 μg/ mL。临床分离株（CLC1-CLC6）的 MIC 值与其相应标准株基本一致，表明小檗碱具有稳定且广谱的抗真菌活性。小檗碱对念珠菌生物膜的抑制作用呈浓度依赖性，并且其抑制作用随念珠菌生物膜的成熟而增强。小檗碱可以降低念珠菌生物膜的活性，通过 CLSM 计算得其活性抑制率在 19.89 ± 0.57 % 和 96.93 ± 1.37% 之间。三维重建结果表明，小檗碱处理组的念珠菌生物膜空间结构较差，且其生物膜厚度减少率介于 15.49±8.45% 至 30.30±15.48% 之间。
结论：小檗碱对浮游态及生物膜态念珠菌均具有显著的抑制作用。本研究为解决多重念珠菌感染及生物膜形成造成的抗真菌剂耐药问题提供了有意义的研究依据。小檗碱有较好的抗真菌治疗潜力，有望成为一种新型抗真菌剂或其主要的活性成分。
关键词：小檗碱，抗真菌作用，念珠菌属，生物膜