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基于纳米自组装短肽的新型气道类器官模型构建及其在腺病毒感染研究中的应用

 

Authors Xu YE, Ao DS , Sun X, Chen W, Luo X, Zhao C, Wang SY, Song H 

Received 23 April 2023

Accepted for publication 28 August 2023

Published 13 September 2023 Volume 2023:18 Pages 5225—5241

DOI https://doi.org/10.2147/IJN.S413743

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Editor who approved publication: Dr Mian Wang

目的:以纳米自组装短肽 RADA16-I 水凝胶为支架材料,构建气道类器官,建立气道类器官腺病毒感染模型,为腺病毒体外分离培养、致病机制研究及抗病毒药物筛选提供实验基础。
方法:将 HSAEC1-KTHuLEC-5a 和 HELF 细胞在 RADA16-I 水凝胶支架中共培养,构建气道类器官模型。用腺病毒感染该模型,评价腺病毒感染前后气道类器官的形态特征及增殖活性;免疫荧光技术检测气道类器官标记蛋白 CC10KRT8AQP5SPCVIM 和 CD31 的表达;透射电镜和 qPCR 检测腺病毒在气道类器官中的增殖。
结果:在纳米自组装短肽 RADA16-I 水凝胶 3D 培养系统中,HSAEC1-KTHuLEC-5a 和 HELF 细胞以 10:7:2 比例共培养,自组装形成气道类器官,并能保持长时间的增殖;类器官稳定表达管腔形成蛋白 KRT8 和气道末端标志物 AQP5 和 SPC;腺病毒能在该模型中复制增殖。
结论:本研究以纳米自组装短肽 RADA16-I 水凝胶作为细胞支架,采用三种人肺源细胞株成功构建了气道类器官腺病毒体外感染模型,该模型有望用于腺病毒体外培养、致病机制研究和抗病毒药物筛选。
关键词:纳米自组装短肽;RADA16-I 水凝胶;气道类器官;腺病毒