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CD55 特异性配体肽在宫颈癌细胞中的筛选及抗肿瘤作用研究

 

Authors Liu G, Yin Q, Ji H, Wang Y, Liu H, Jiang L, Zhu F, Li B

Received 2 August 2018

Accepted for publication 10 October 2018

Published 13 November 2018 Volume 2018:12 Pages 3899—3912

DOI https://doi.org/10.2147/DDDT.S182337

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Editor who approved publication: Dr Anastasios Lymperopoulos

背景:为了提高抗肿瘤药物的靶向能力,我们鉴定了与肿瘤逃逸相关的肿瘤细胞表面高表达的抗原,如补体调节蛋白 CD55 分子,也称为衰变加速因子。在该研究中,噬菌体展示技术用于筛选和鉴定与宫颈癌 HeLa 细胞表面上的 CD55 分子结合的 CD55 特异性配体肽(CD55sp)。然后,我们探索了该肽在体外抑制宫颈癌细胞生长中的作用。我们对 CD55sp 的表征研究将为肿瘤靶向治疗提供意义。
方法:采用噬菌体展示技术分离与 HeLa 细胞表面结合的噬菌体。通过 ELISA 鉴定阳性噬菌体克隆。然后扩增噬菌体并在单克隆 DNA 提取后通过琼脂糖凝胶电泳确定。进行 DNA 测序和生物信息学分析以获得特异性配体肽。流式细胞术和免疫荧光法用于测定 CD55 分子在肿瘤表面和正常细胞上的表达。随后,通过细胞计数试剂盒-8CCK-8),流式细胞术和 TUNEL 试验分别测定 CD55sp 对 HeLa 和 SiHa 细胞增殖和凋亡的影响。通过电子显微镜检查凋亡细胞的形态。通过免疫荧光检测 Cleaved caspase-3 的分布。通过 Western 印迹测定 bcl-2 和 Cleaved caspase-3 的表达。
结果:结果显示肽(QVNGLGERSQQM)作为配体肽可以与宫颈癌 HeLa 和 SiHa 细胞表面上的 CD55 分子结合。它还能有效抑制宫颈癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡。
结论:本研究表明,噬菌体展示技术筛选的 CD55sp 具有很强的抗肿瘤作用。
关键词:噬菌体展示,宫颈癌,CD55sp,配体肽,细胞凋亡




Figure 10 CD55sp induces the expression of Cleaved caspase-3 in tumor cells.