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乳酸脱氢酶 A 的赖氨酸三甲基化的鉴定及功能表征
Authors Li L, Zhao Z, Jiang W, Guo J, Zhang S
Received 13 March 2019
Accepted for publication 13 June 2019
Published 8 July 2019 Volume 2019:12 Pages 5395—5404
DOI https://doi.org/10.2147/OTT.S208637
Checked for plagiarism Yes
Review by Single-blind
Peer reviewers approved by Ms Rachel Predeepa
Peer reviewer comments 2
Editor who approved publication: Dr Sanjeev Srivastava
背景:组蛋白的三甲基化已被广泛研究,组蛋白甲基转移酶催化 s-腺苷蛋氨酸的甲基转移。目前,还没有对非组蛋白三甲基化的研究。三甲基化影响细胞发育和相关蛋白功能的确切机制尚不清楚。
目的:本研究的目的是鉴定肾脏来源细胞和组织中发生赖氨酸三甲基化的蛋白,并更好地了解赖氨酸三甲基化介导的细胞代谢机制。
方法:采用 Western blot 测定肾源性细胞和组织中赖氨酸三甲基化水平。利用高分辨率质谱分析肾源性细胞和组织,构建引起赖氨酸突变的真核细胞表达载体,转染到 HEK293T 细胞中。在赖氨酸三甲基化被抑制条件下检测 HEK293T 细胞的 LDHA 活性,用 EdU 和 Western blot 分析 HEK293T 细胞的增殖情况。
结果:肾源性细胞和组织中不同蛋白的赖氨酸三甲基化水平不同。乳酸脱氢酶 A(LDHA)的赖氨酸(K5)发生三甲基化。LDHA 中赖氨酸三甲基化被抑制增强了 HEK293T 细胞的 LDH 活性,促进了 HEK293T 细胞的增殖。
结论:LDHA 通过赖氨酸三甲基化介导的机制影响细胞的代谢和增殖。赖氨酸三甲基化可能成为治疗的一个潜在靶点,或作为多种疾病预后和治疗的生物标志物。
Keywords: trimethylation, lactate dehydrogenase A, liquid chromatography-tandem mass spectrometry, cell, kidney cancer, proliferation