目的：血管紧张素-（1-7）（angiotensin-(1-7)，Ang-(1-7)）已被证实为一种重要的抗炎和抗纤维化因子，但其具体机制尚不明确。本研究旨在探讨 ACE2-Ang-(1‑7)-Mas 受体轴调控炎症状态下的巨噬细胞表型转换以及盲肠结扎穿孔诱导的脓毒血症小鼠炎症的相关信号转导机制。
方法：实验分为两个部分：第一部分，将体外培养巨噬细胞（RAW264.7）分为 6 组：对照组，LPS 组，LPS+Ang-(1-7) 组，LPS+ Ang-(1-7)+A-779 组，Ang-(1-7) 组，A-779 组。使用 ELISA、Western blot、qRT-PCR 检测巨噬细胞上清中促炎及抗炎因子的释放水平。流式细胞术检测 M1 型巨噬细胞表面标志物 CD86、M2 型巨噬细胞表面标志物 CD163 的表达。Western blot 和免疫荧光检测巨噬细胞中炎症相关 NF-κB 和 MAPKs 信号通路的变化。第二部分，随机将 40 只雄性昆明小鼠（KM 小鼠）分为 5 组：对照组，假手术+生理盐水组，假手术+Ang-(1-7) 组，脓毒血症+生理盐水组，脓毒血症+ Ang-(1-7) 组。ELISA 检测各组小鼠血清中促炎及抗炎因子水平。HE 染色观察脾脏结构及炎症细胞浸润情况。免疫荧光、流式细胞术检测小鼠脾脏中巨噬细胞的总量及 M1、M2 表型占比情况。免疫组化、Western blot 检测脾脏中 NF-κB 和 MAPKs 信号通路的变化。
结果：体外实验证实 Ang-(1-7) 抑制炎症诱导的 TNF-α 和 IL-6 促炎因子的表达，促进 IL-4 和 IL-10 抗炎因子的表达。Ang-(1-7) 降低 M1 型巨噬细胞标志物 CD86、TNF-α 和 INOS 的表达，升高 M2 型巨噬细胞标志物 CD163 和 ARG1 的表达，证实了 Ang-(1-7) 抑制巨噬细胞的 M1 型活化，促使其朝向 M2 型转变。同时 ACE2-Ang-(1‑7)-Mas 轴可通过影响 TLR4 受体的表达，抑制 NF-кB 和 MAPKs 信号通路从而达到调控巨噬细胞表型转换的作用。体内实验证实 Ang-(1-7) 可缓解脓毒血症小鼠脾亢及脾脏中巨噬细胞浸润，抑制脾中 M1 型巨噬细胞极化并促使其朝向 M2 型转变。同时 ACE2-Ang-(1‑7)-Mas 轴能抑制脾脏中 TLR4 受体及其介导的 NF-кB 和 MAPKs 信号通路的表达，起到抗炎的作用。
结论：（1）ACE2-Ang-(1‑7)-Mas 轴可降低炎症刺激下巨噬细胞及脓毒血症小鼠的炎症应答，促进抗炎因子的释放。（2）ACE2-Ang-(1‑7)-Mas 轴可有效抑制 M0 型巨噬细胞朝向 M1 型极化，同时促进 M2 型巨噬细胞的活化。（3）ACE2-Ang-(1‑7)- Mas 轴通过抑制 TLR4 受体介导的 NF-κB 和 MAPKs 信号通路，发挥抗炎作用。
关键词：血管紧张素 1-7，巨噬细胞极化，脓毒血症，Toll 样受体 4