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壳聚糖纳米硒通过抑制 ROS/JNK 介导的细胞凋亡来减弱 PRRSV 的体外复制
Authors Shao C, Yu Z, Luo T, Zhou B, Song Q, Li Z, Yu X, Jiang S, Zhou Y, Dong W, Zhou X, Wang X, Song H
Received 13 April 2022
Accepted for publication 4 July 2022
Published 7 July 2022 Volume 2022:17 Pages 3043—3054
DOI https://doi.org/10.2147/IJN.S370585
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Editor who approved publication: Dr Farooq A. Shiekh
摘要:猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRSV)是一种可感染猪并引起育肥猪呼吸窘迫和怀孕母猪广泛生殖障碍的病毒,严重危害生猪养殖业健康发展。纳米硒是一种单质硒,大量研究表明其具有抵抗氧化应激、抗菌和抗肿瘤的作用。本研究以还原法制备了壳聚糖纳米硒(CS-SeNPs),通过细胞学和分子生物学等方法研究了 CS-SeNPs 对 PRRSV 的生物活性及其分子机制。试验分为对照组,CS-SeNPs 组,r-PRRSV-EGFP 感染组,CS-SeNPs+r-PRRSV-EGFP 组。r-PRRSV-EGFP 感染 Marc-145 细胞 48 h 后,分别检测细胞中 H2O2、GSH、GSH-Px 和 ROS 水平,用 qRT-PCR 测定 PRRSV ORF5 mRNA 水平,用 TCID50 方法测定病毒滴度,用 Western blot 法检测各组细胞中 JNK、Caspase-3、PARP 和 PRRSV N 蛋白的表达量,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡变化。结果显示:CS-SeNPs 可通过增强 GSH-Px 活力,提高 GSH 的产生,降低 ROS 和 H2O2 产生来抑制由 r-PRRSV-EGFP 感染引起的氧化应激。与 r-PRRSV-EGFP 感染组相比,CS-SeNPs+r-PRRSV-EGFP 组中 PRRSV 的病毒滴度,ORF5 mRNA 水平和 N 蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。CS-SeNPs 能抑制 PRRSV 引起的 JNK 的磷酸化水平,抑制 Caspase-3 及 PARP 的切割(P<0.01),CS-SeNPs 能显著抑制由 PRRSV 引起的细胞凋亡(P<0.01)。综上所述,本研究首次证实了 CS-SeNPs 可以通过抑制 ROS/JNK 介导的细胞凋亡来减弱 PRRSV 复制,这为纳米硒抗病毒生物活性的深入研究提供给了基础。
关键词:壳聚糖纳米硒;PRRSV;细胞凋亡;ROS;JNK 信号通路