目的：梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的一种性传播疾病，可导致慢性感染和不良并发症。在临床实践中，血清固定 (SF) 患者的临床症状与健康人群或梅毒血清治愈者的表现相似，往往需要长时间的随访以进行明确诊断。目前，人们对血浆外泌体 miRNA 作为检测传染病的生物标志物的潜力越来越感兴趣。在这项研究中，我们旨在探索 SF 中 miRNA 的诊断潜力及其可能的生物学意义。
样本与方法：从二期梅毒（SS）、SF、血清学治愈（SC）和健康对照（HC）共 20 名参与者的外周血样本中分离提纯外泌体 miRNAs，并通过微阵列芯片测序分析确定各组间差异表达的 miRNAs（DEmiRNAs）。然后对 miRNA 靶基因进行预测、功能注释，包括 GO 和 KEGG 通路分析。通过定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）在 37 名参与者中验证了四个 miRNAs 的差异表达，并进行了 ROC 分析，以评估这些 miRNAs 在区分 SF 与 HC 或 SC 的诊断敏感性和特异性。
结果：通过微阵列芯片测序分析鉴定了 SF 患者血浆外泌体 miRNA 的表达谱，SF 与 HC 的 miRNA 表达谱相近，仅一个 miRNA 表达差异；与 SS 差别较大，有 44 个差异表达的 miRNA；与 SC 相比，仅 11 个 miRNA 表达有显著性差异。根据 GO 和 KEGG 分析，发现 DEmiRNAs 的靶基因与一系列生物过程有关，如转录调节、线粒体、高尔基体、免疫系统、细胞凋亡、Ras 信号通路等。扩大样本后行 RT-qPCR 验证 miR-1273g-3p、miR-4485-5p、miR-197-3p 和 miR-1908-3p 在 SF 患者中差异表达与芯片测序结果一致，ROC 分析结果显示这 4 个 miRNA 的组合相比单个 miRNA 能够进一步提高区分血清固定与血清治愈的敏感度和特异度。
结论： 血浆外泌体中的 DEmiRNAs 可能在 SF 的发病机制中起重要作用，并有可能成为一种新型且有效的诊断方法。
Keywords: serofast status, syphilis, microRNA, exosome, biomarker