简介：中和抗体（Neutralizing Antibody，NAb）是预防新型冠状病毒再感染和复发的关键因素；但是由于缺乏实用、有效的 NAb 检测方法，接种疫苗或感染后 NAb 的产生情况仍然无法准确判断。这项研究开发了一种准确、方便的 NAb 即时检测试剂盒，可在 20 分钟内完成血清 NAb 水平的评估。
方法：本研究利用 Sf 9 和 293T 系统表达 RBD-Fc 和 ACE2-His，通过柠檬酸钠还原氯金酸制备出了澄清透亮、粒径均一、重悬性良好的胶体金，并将胶体金与 ACE2 成功耦联。在优化了各种制备条件后，构建了中和抗体侧向免疫层析试剂盒。随后，对其检测限、特异性和稳定性进行了系统评估，并对临床样本进行了分析，以验证其临床可行性。
结果：所制备的 RBD-Fc 和 ACE2-His 的纯度分别为 94.01% 和 90.05%。合成的胶体金分布均匀，平均粒径为 24.15±2.56nm。该试剂盒检测限为 2 μg/mL，在 684 份未感染的临床样本中，该方法的灵敏度为 97.80%，特异性为 100%。对 356 例感染后临床样本进行检测，结果表明，NAb 表达量较注射疫苗后更高，且没有性别和年龄依赖性，同时该研究快速检测试剂盒与 ELISA 之间的总体符合率为 95.22%。并且我们注意到 16.57% (59/356) 的个体在感染后仍然没有产生 NAbs。该试剂盒可在 20 分钟内通过肉眼获得检测结果，无需依靠任何额外的仪器设备。
结论：本研究开发了一种准确、便携的 NAb 即时检测方法，适用于新冠病毒 NAb 的家庭自检及大规模筛查。根据 1040 个临床样本分析，初步揭示接种疫苗和感染病毒后 NAb 产生规律。该研究可为精确的疫情防控提供有力支撑。
关键词：临床检测；胶体金；中和抗体；即时检测；新型冠状病毒