背景：肝纤维化是一种与细胞外基质（ECM）蛋白的过度积累有关的慢性肝病，最终可导致肝硬化和肝癌的发生。
目的：在肝纤维化治疗的多种策略中，使用具有影响多种通路能力的联合方法已被证明具有更高的疗效。本研究旨在优化和表征吡非尼酮（PF）和 AMD3100（AMD）共同包封于 CXCR4 靶向组合脂质体（CTC 脂质体），使其在具有 CXCR4 靶向能力的同时能够通过多途径干预发挥治疗肝纤维化的作用，并在体外对参与肝纤维化发生通路的主要分子的抑制即 α-SMA，CXCR4，TGFβ 和 P-p38 进行分析。
方法：采用薄膜水合法制备 CTC 脂质体。通过高效液相色谱法（HPLC）和紫外分光光度法（UV）分别测量包封的 AMD 和 PF 的浓度。透射电子显微镜（TEM）用于确定脂质体形态。通过 CXCR4 再分布实验测定 CTC 脂质体的 CXCR4 的靶向能力。共聚焦显微镜和流式细胞术用于确定 CTC 脂质体通过 CXCR4 介导的细胞摄取。通过凋亡实验和蛋白质印迹法分析 CTC 脂质体诱导的凋亡和蛋白质下调的能力。使用体内生物分布和 Hoechst 染色来分别确认 CTC 脂质体在体内应用和药物靶向蓄积的可行性。
结果：TEM 研究显示 CTC 脂质体呈球形。48 小时后，从 CTC 脂质体中释放的 AMD 和 PF 分别达到 67% 和 84%。与游离药物相比，CTC 脂质体显示出更高的细胞活力。CXCR4 再分布实验证实了 CTC 脂质体的 CXCR4 靶向拮抗能力。CTC 脂质体通过小窝介导的内吞途径实现更有效地内化。CTC 脂质体在 TGFβ 诱导活化的 HSC-T6 细胞中显示出侵袭性细胞凋亡（87.3%），表明纤维化消退的倾向。此外，CTC 脂质体显著降低 α-SMA（65%）、CXCR4（77%）、TGFβ（89%）和 P-p38（66%）的表达，明显优于游离药物。通过体内成像、生物分布和 Hoechst 染色发现与游离 IR780 相比，CTC@IR780 脂质体（掺入 IR780 染料的 CTC 脂质体）在纤维化肝脏中能够实现更多地积累。这些发现表明这种简单而稳定的 CTC 脂质体递送系统对治疗和预防肝纤维化具有很大的应用前景。
关键词：AMD3100；吡非尼酮；脂质体；肝纤维化